מֵידָע

תפקיד הפפאין בפפאיה

תפקיד הפפאין בפפאיה


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

אני יודע שפפאין הוא אנזים פרוטאוליטי הקיים בפפאיה. הוא משמש לעתים קרובות לריכוך בשר. מה תפקידו של הפפאין בפפאיה? האם פפאין מתוק? האם הוא מתפקד כאנטיביוטיקה?


פפאין הוא פרוטאז ציסטאין, ויקיפדיה אמורה להספיק לו:

פרוטאזות ציסטאין ממלאות תפקידים מרובי פנים, כמעט בכל היבט של הפיזיולוגיה וההתפתחות בצמחים כגון בצמיחה והתפתחות, בהתבגרות ובאפופטוזיס (מוות תאים מתוכנת), בהצטברות וניוד של חלבוני אחסון כמו בזרעים. בנוסף, הם מעורבים באיתות נתיבים ובתגובה ללחצים ביוטיים ואביוטיים. בבני אדם הם אחראים לאפופטוזיס, לתגובות החיסון מסוג MHC II, לעיבוד פרו -הורמונים ולשיפוץ מטריקס חוץ -תאי החשוב להתפתחות העצם.


פפאין, אנזים צמחי בעל חשיבות ביולוגית: סקירה

פפאין הוא אנזים פרוטאוליטי צמחי לאנזים של ציסטאין חלבונים ציסטאין ציסטאין פרוטאז שבו חלה התקדמות עצומה להבנת תפקודיו. פפאין נמצא באופן טבעי בפפאיה (קאריקה פפאיה L.) המיוצר מלטקס של פירות פפאיה גולמיים. האנזים מסוגל לפרק מולקולות אורגניות העשויות מחומצות אמינו, הידועות כפוליפפטידים ובכך ממלא תפקיד מכריע בתהליכים ביולוגיים מגוונים במצבים פיזיולוגיים ופתולוגיים, עיצובי תרופות, שימושים תעשייתיים כגון מרככי בשר ותכשירים פרמצבטיים. המבנה הייחודי של פפאין מעניק לו את הפונקציונליות שעוזרת להבהיר כיצד אנזימים פרוטאוליטיים פועלים וגם הופכת אותו לבעל ערך למגוון מטרות. בסקירה הנוכחית מוצגים חשיבותו הביולוגית, תכונותיו ותכונותיו המבניות החשובות להבנת תפקידם הביולוגי. נדונים גם פוטנציאל הייצור וההזדמנויות בשוק.

כרך 8 מס '2, 2012, 99-104

נשלח בתאריך: 13 במאי 2012 פורסם ב: 22 ביוני 2012

איך לצטט: Mamboya, F. & Amri, E. (2012). פפאין, אנזים צמחי בעל חשיבות ביולוגית: סקירה. כתב העת האמריקאי לביוכימיה וביוטכנולוגיה, 8(2), 99-104. https://doi.org/10.3844/ajbbsp.2012.99.104

זכויות יוצרים: © 2021 פירנצה ממבויה ויחזקאל עמרי. זהו מאמר בגישה פתוחה המופץ תחת התנאים של Creative Commons Attribution License, המאפשר שימוש, הפצה ושכפול ללא הגבלה בכל מדיום, בתנאי שהכותב והמקור המקוריים מקבלים קרדיט.


Arterivirus Papain-like Proteinase 1α

דני ד. Nedialkova ,. אריק ג'יי סניידר, בספר היד של אנזימים פרוטאוליטיים (מהדורה שלישית), 2013

תכונות ייחודיות

PLP 1α הוא תחום חלבון ציסטאין קטן דמוי פפאין, המקושר לתחום אצבע אבץ מסוף N (איור 499.2). הוא מבקע את הפוליפרוטאינים העתקים של arterivirus pp1a ו-pp1ab ב-cis

35 שאריות במורד הזרם של האתר הפעיל שלו שאריות שלו, ובכך משחרר את יחידת המשנה nsp1α של מסוף ה- N של העתק PRRSV ו- LDV. נראה כי הפעילות הפרוטאוליטית של PLP 1α אבדה במהלך התפתחות ה- EAV.

אנטיסרום ארנב פוליקונלי נגד EAV nsp1 גדל על ידי חיסון עם פפטיד המייצג את 23 השאריות הראשונות של pp1a [8]. סרום זה זמין מהכותבים למטרות מחקר לפי בקשה. כמו כן תועד ייצור נוגדן חד שבט עכבר (12A4) המזהה EAV nsp1 [36]. אנטיסרה פוליקונאלית המכוונת נגד nsp1α ו- nsp1β מ- PRRSV-II תוארה לאחרונה [19].


היתרונות של אנזים פאפאין

1. ממריץ את העיכול

אחד התחומים המרכזיים שבהם הפפאין משרת את הגוף הוא בתחום תכונות העיכול של החלבון. מחקר מקרה אחד מצא שכאשר חולה זכר עם אי סבילות לגלוטן אכל דיאטה נטולת גלוטן, הוא עדיין חווה שלשול, אך כאשר נטל בנוסף 1800 מ"ג פפאין למשך חודש אחד, היו לו פחות צואה רופפת ופחות ספיגה לקויה. זה רק מחקר אחד, וצריך לערוך מחקרים נוספים.

2. מסייע לריפוי עור ופצעים

בשל היכולות המועילות של פפאין, אנשים השתמשו בו במשך שנים רבות כיישום אקטואלי לכוויות, כיבים, גירויים, פצעים ושאר פצעים, וכדי לסייע להחלמה מפציעות ספורט. כמה מתרגלים השתמשו בו בחללי שיניים. הפעולה האנזימטית של פפיין היא מאוד ספציפית, והיא אינה פוגעת בעור בריא. התרבויות המסורתיות בהוואי ובטהיטי יצרו קופיות מעורות הפפאיה, שכן בחלק זה של הפרי יש ריכוז גבוה במיוחד של פפאין. מרפאים מסורתיים מרחו את החומר הזה על העור כדי לרפא פצעים, כוויות, פריחות ועקיצות חרקים.

3. מעכל ריר

מחקרים מצאו כי פפאין מעכל סינוס מוצין, גליקופרוטאין המצוי בריר, ולכן עשוי להיות בעל השפעות מועילות עבור אנשים הסובלים מבעיות בסינוסים. פפאין הופך את הריר לצמיג פחות, או זורם יותר, ולכן ניתן לסלק אותו בצורה טובה יותר. בגלל תכונה זו, כמה חוקרים חוקרים כיצד פפאין יכול לסייע בהעברת תרופות ננו-חלקיקים לגוף כך שיוכלו לעבור את המחסום הרירי הטבעי של הגוף במעיים. שימוש בפפאין עם חלקיקים עשוי להיות לא הטוב ביותר לבריאותך.

4. תומך בתפקוד מערכת החיסון

מחקרים מצאו שלפפאין עשוי להיות תכונות נוגדות התפשטות תאים. כמה מחקרים הראו שפפאין נותן השפעה חזקה בעוד שאחרים לא מצאו הבדל בין פפאין לביקורת. מאמר סקירה מצא עדויות חזקות לתכונות התפקוד החיסוני הכולל של הפפאיה.

5. מתנגד לאדמומיות וגירוי

מחקרים מאשרים כי אנזים פפאין מציע עמידות עוצמתית לאדמומיות ולגירוי. פפאין מסייע בספיגה של חומר מועיל אחר, קוורצטין. מחקר אחד מצא שכאשר ניתנו פפאין וברומליין יחד עם קוורצטין, זה עזר לתסמיני נפיחות הקשורים לבריאות הערמונית.

6. פועל כנוגד חמצון

פפאין מכיל תרכובות שעשויות לסייע בהגנה על הגוף מפני נזק תאי הנגרם על ידי רדיקלים חופשיים, מה שהופך אותו לנוגד חמצון. התרכובות במיץ הפפאיה שולפות ביעילות, או נוגדות, רדיקלים חופשיים של הידרוקסיל (OH-) תגובתי מאוד, כמו גם תחמוצות-על. לפפאין יש רמה נוגדת חמצון בהשוואה לוויטמינים E ו- C. במחקר אחד, זן Solrise Solo (סוג של פפאיה) היה יעיל יותר כנוגד חמצון מאשר שני זנים אחרים.

7. מונע קלקול מזון

מאז מחקרים הראו לפפאין תכונות אנטי-פטרייתיות ואנטי-בקטריאליות, ולעתים משתמשים בו לשימור מזון באופן טבעי. זהו חומר רב עוצמה הנפוץ בשימור מזון, הפחתת נגיעות חיידקים וקלקול עקב חמצון.

איך פפאין רך בשר?

המאפיינים החשובים ביותר של איכות הבשר הם רכות, עסיסיות וטעם. צרכנים רואים ברוך את הגורם החשוב ביותר בקביעת שביעות רצון מאכילת בשר בקר (Issanchou, 1996, Boleman, Miller, Taylor, Cross, Wheeler, Koohmaraie, Johnson and Sawell, 1997). רגישות מוגדרת כקלות העפעף, הכוללת את הקלות הראשונית של החדירה על ידי השיניים, הקלות שבה הבשר מתפרק לשברים וכמות השאריות שנותרו לאחר השד (Lawrie, 1998).

רגישות הבשר תלויה בתבלינים, גזע, גיל, מין ורקמת שריר השלד האישית של החיה. רגישות מקורה בתכונות מבניות וביוכימיות של סיבי שריר השלד, במיוחד מיופיברילים וחוטי ביניים, ושל רקמת החיבור התוך-שרירית, האנדומיזיום והפרימיזיום, המורכבות מסיבים וסיבים של קולגן (Takahashi, 1996). היציבות המכנית של סיבים של קולגן עלתה בצורה ניכרת עם ההזדקנות הכרונולוגית.

בשר המופק מחיה זקנה הוא קשה ואיכות אכילה נמוכה יותר. שיפור רכות הבשר של בקר מיושן נחוץ כדי להעלות את התכונות התפקודיות ואת ערכו של הבשר (Shiba, 2004). ניתן לרכך בשר בדרכים שונות: שיטות מכניות (טחינה או מכות כדי לרסק את רקמת הלחמית והשריר), שיטות כימיות על ידי הזרקת פתרונות השריר עם חומרים כימיים (מלח, נתרן כלורי, נתרן פוליפוספט, אשלגן לקטט, נתרן דיאצטט כל מומס למים, RK, 2003), בשיטות אנזימטיות השתמשו באנזימים פרוטאוליטים כמו פפאין, ברומליין או פיצין.

ריכוך אנזימטי יכול להתבצע בצורה לחה (על ידי הזרקת תמיסות השריר עם תכשירים אנזימטיים) או בצורה יבשה (לחיצה על תערובות רכות על פני הבשר). יש לקבוע את סוף תהליך הריכוך ואת השיטה המשמשת ליישון ולעיבוד תרמי כדי לקבל איכות חושית מיטבית של הבשר.

הזרקה של נתחי בקר עם פפאין גורמת לשיפור חשוב של המאפיינים התפקודיים של בקר מבוגר. פפאין הוא תכשיר פרוטאז רב עוצמה, בעל סגוליות רבה מתחת לשכבה, המזרז את שבירת הקשרים הפפטידים במולקולות החלבון ומוצרי הפירוק שלהם לחומצות אמינו. עליית רמת הפפאין, ממלח הזרקה, וכן העלאת זמן היישון, קבעו היחלשות משמעותית של מבנה הבשר. ריכוך הפפאין של בשר הבקר הבוגר קבע את השיפור ברכות, טעם ועסיסיות. מומלץ להשתמש במינוני פפאין נמוכים ככל האפשר, על מנת למנוע ריכוך מתקדם וקבלת בשרים בעלי מבנה רך, עם עמידות נמוכה מאוד לעיסה ומרקם משחה. יישום של טכנולוגיה זו יכול לסייע ליצרני ומעבדי בשר בקר להשיג מוצרי בשר שיכולים לספק את ציפיות הצרכנים.

סיכום

ליכולת של פפאין לפרק חלבונים יש שימושים נוספים מלבד ריכוך הבשר. הוא משמש בתמיסות לניקוי אנזים לעדשות מגע ובמשחות רפואיות המשמשות לטיפול בפצעים קשים.

כמובן, ישנן דרכים אחרות לרכך בשר מבלי להשתמש בכימיקלים. אתה יכול פשוט להשתמש בפטיש בשר כדי לפרק את מולקולות החלבון הגדולות על ידי הכפתן לחתיכות קטנות יותר, אבל שיטה זו לא תעבוד, כפי שעושה פפאין, גם על בשר וגם על עדשות מגע.


תפקיד הפפאין בפפאיה - ביולוגיה

פפאין, המצוי באופן טבעי בפפאיה ופעמים רבות המכונה "פפסין צמחי", הוא אנזים חשוב תעשייתי המשפיל חלבון לתעשיית המזון והקוסמטיקה. תעשיית הקוסמטיקה משתמשת בפפאין בטיפולי פילינג להסרת עור משטח מת ואפילו יש שמפו על בסיס אנזימים עבור חיות מחמד הבית לניקוי הפרווה והקלה על הצחצוח.

אבל הרבה דברים טבעיים יכולים לעורר תגובות אלרגיות.

העור מורכב מכמה שכבות המחוברות באמצעות חיבורים סלולריים הנקראים "צמתים הדוקים". במחקר חדש הראו המחברים כי פפאין גורם להתמוטטות של צומת תאים אלה. על העור, פפאין גורם לאובדן תפקוד המחסום. לכן כאשר בני אדם או בעלי חיים באים במגע עם פפאין, תגובות אלרגיות חזקות של העור יכולות להיות התוצאה. העבודה החדשה חקרה את השפעת הפפאין ישירות על עור העכברים, כמו גם על תאי העור בצלחת הפטרי.

"לאחר פרק זמן קצר בלבד, פפאין הגביר את חדירות כלי הדם ותאים דלקתיים חדרו לעור", אומרת אריקה ג'נסן-ג'ראולים, ראש המחלקה לרפואה השוואתית במכון המחקר מסרלי.

כשבועיים לאחר שנחשפו לפפאין, החוקרים מצאו נוגדנים לפפאין בעכברים. אימונוגלובולינים אלה הם הגורם לתגובה האלרגית כלפי האנזים.

"עכברים חשופים לא רק חוו אובדן של תפקוד המחסום של העור, אלא גם היו בעלי רגישות אלרגית ספציפית לפפאין. החיות פיתחו אלרגיה", אומרת ג'נסן-ג'רולים.

אך נראה כי חדירת מחסום העור אינה תנאי מוקדם לרגישות כלפי פפאין.

"האנזים נשאר אלרגני גם כשהתפקוד האנזימי שלו נחסם", מסביר ג'נסן-ג'ראולים. ההפרעה במחסום העור, היא אומרת, חיונית לחדירת אלרגנים וחיידקים אחרים. בבני אדם ובעלי חיים, מחלות עור כגון אטופיק דרמטיטיס, המכונה בדרך כלל אקזמה, כרוכות בחדירות מוגברת של העור עם סיכון מוגבר להתיישבות חיידקית, פטרייתית או ויראלית. מלבד גורמים גנטיים, אנזימים אלרגניים ממקורות חיצוניים עשויים לתרום לתסמינים.

מדהים כי לפפאין יש דמיון מבני עצום עם אחד האלרגנים החשובים לקרדית אבק הבית. החוקרים מסכמים כי רגישות כלפי אלרגנים אלו של קרדית אבק הבית פועלת לפי אותו עיקרון.


נהלים ניסויים

חרקים

כדי לבחון את ההשפעה של הלטקס על זחלי הלפידופטרנים אוכלי עשב, השתמשנו בזחלים של שורה של ארי silkmoth (S. ricini, Saturniidae) המתוחזק במכון שלנו כחרק ניסיוני. מוצאו של מין זה גודלו באופן נרחב בצפון הודו כדי לייצר משי. הזחלים הם אוליגופגיים וצמחי המארח שלהם כוללים את צמחי שמן הקיק, האילנטוס, הקסאווה, הקסרו והפלומריה. עם זאת, בסופו של דבר הוא יאכל כל מיני צמחים, אלא אם כן העלים קשים או שעירים מדי, ולאחר מכן יראו סימפטומים, כגון מוות מהרעלה ומעכבי גדילה כתגובה לצמח המתאים. הזחלים משמשים בהצלחה לביצוע בדיקות ביולוגיות להערכת רמות ההגנה של הצמחים כנגד חרקים אוכלי עשב (Fukui ואח '., 2002 ). M. brassicae ו S. litura שסופקו בחביבות על ידי Hokko Chemical Industry Co. Ltd., (טוקיו, יפן) ולאחר מכן נשמרו במכון שלנו, שימשו גם לבדיקות ביולוגיות.

בדיקות ביולוגיות

עלים צעירים שלמים שהגיעו לחצי מגודלם הבוגר ועדיין היו רכים נאספו מאנשים שגדלו בחממה (סי פפאיה), גדל בחוץ (ג'סמינואידים), או מדגימות הגדלות באופן טבעי באי ישגאקי, אוקינאווה, יפן (F. virgata), או בצוקובה, איברקי, יפן (M. bombycis, T. officinale, מ 'ג'פוניקה, C. majus, ו O. japonica). במקרים של ו 'וירגאטה וכל הצמחים האחרים למעט פפאיה, עלים שלמים שנאספו מגבעולים על ידי חיתוך של עלי הכותרת שימשו ישירות לבדיקות ביולוגיות. במקרה של פפאיה, שיש לה עלי דקל גדולים מאוד עם חמש עד שבע אונות, עלי דקל שלמים נאספו על ידי חיתוך הפטוטרות, לאחר מכן נאספו האונות על ידי חיתוך כל עלה בבסיסו האונות שימשו לבדיקות ביולוגיות. עבור כל סט של מבחני ביו עם טיפולים שונים להשוואה, נעשה שימוש באונות שנאספו מאותו עלה וממצבים סמוכים. בתהליכי איסוף אלו, כמות מסוימת של הלטקס הצמחי הייתה צפויה להתנקז מהחתכים. עם זאת, היה ברור שכמות ניכרת של לטקס נותרה בעלים או בכותרות עליונות שנאספו, בהתבסס על העובדה שראינו הרבה לטקס המגיח לאחר חיתוך נוסף בוצע על העלים או האונות שנאספו. ניקוז הלטקס בתהליכי האיסוף אולי גרם להערכה מסוימת של ההשפעות הביולוגיות של לטקס, אך לעולם לא יגרום להערכת יתר ולכן, הסיקנו כי לא סביר שתהליכי האיסוף היו משפיעים על התוצאה הרלוונטית ביותר של מחקר זה (כלומר ציסטאין פרוטאזות בלטקס הם הגורמים החשובים ביותר במערכות ההגנה על הצמח, ויכולים להגן על הצמחים אפילו מהמזיקים הפוליפגיים ביותר).

על מנת לבחון את ההשפעות הביולוגיות של לטקס על חרקים, ניסינו לשטוף לטקס מהעלים לפני האכלתם לזחלים. לשם כך, עלים (1-3 גרם) נחתכו לרצועות עלים צרות (רוחב 2-5 מ"מ) בעזרת מספריים, ולאחר מכן נשטפו את רצועות העלים פעמיים ב -500 מ"ל מים. העלים טופחו במגבות נייר ולאחר מכן שימשו לבדיקות ביולוגיות.

כדי לבחון את תפקידי ההגנה של פרוטאזות ציסטאין, ביצענו בדיקות ביולוגיות באמצעות מעכב ספציפי לפרוטאז ציסטאין, E-64, N-[N-(l -3-עָבָר-קרבוקסיוקסיראן-2-קרבוניל)-l-לאוציל] -אגמטין, מבודד במקור מתמצית תרבות של אספרגילוס japonicus ונקבע מבנהו (הנאדה ואח '., 1978a, ב). E-64 הוא מעכב ספציפי לציסטאין פרוטאז קפדני ומראה השפעות מעכבות על ציסטאין פרוטאזות כגון פפאין, פיצין, ברומלין וקטפסין B בריכוזים נמוכים, למרות שהוא אינו מראה השפעות מעכבות על פרוטאזות השייכות לקבוצות פרוטאזות אחרות כגון טריפסין, כימוטריפסין, אלסטאז, פלסמין ופפסין אפילו בריכוזים גבוהים מאוד (Hanada ואח '., 1978b), ולפיכך, לא סביר ש-E-64 ישפיע על פעילותם של פרוטאזות עיכול במעי האמצעי של חרקי הלפידופטרן, בהתחשב בכך שפרוטאזות האמצע העיקריות של חרקי הלפידופטרן הן פרוטאזות סרין, וציסטאין פרוטאזות לא נמצאו ( טרה ואח '., 1996). הבסיס המבני של עיכוב ציסטאין פרוטאזות על ידי E-64 נחקר לאחרונה, ומחקרים אלו גילו כי טבעת האפוקסיד של E-64 תוקפת ונקשרת באופן קוולנטי לקבוצת הציסטאין הפעילה SH באתר הקטליטי של מולקולת ציסטאין פרוטאז. עיכוב בלתי הפיך של ציסטאין פרוטאז (Matsumoto ואח '., 1999). כדי לבחון את ההשפעה של המעכב הספציפי לפרוטאז ציסטאין E-64, תמיסת 5 מ"מ של E-64 בגליצרול 0.5%, אזי פתרון זה נצבע באופן שווה על פני העלים ב -200 µl g -1 עלה טרי (כלומר 0.36 מ"ג. E-64 גרם -1 עלה טרי). הקפידו לצבוע את העלים בצורה אחידה כך שההיקף יהיה צבוע היטב. גליצרול נוסף כדי להפוך את הדבק E-64 למשטח העלה. בדפי בקרה, המוצגים באיורים 2 ו-3 ובטבלה 1, עליהם לא נצבע E-64, נצבעה תמיסת גליצרול של 0.5% בלבד. הוכנו דיאטות מלאכותיות המכילות ציסטאין פרוטאזות על בסיס דיאטת L4M (Nihon Nosan Kogyo Co., יפן), המורכבת בעיקר מאבקת סויה ומשמשת לחרקים פוליפאגיים. ל-1 גרם של דיאטת L4M, חיץ נתרן פוספט 200 μl (50 מ"מ, pH 7.0) שהכיל 4 מ"ג ציסטאין ו-0 או 20 מ"ג פפאין (P-3250 לדיאטת פפאין A, P-4762 לדיאטת פפאין B , סיגמא, סנט לואיס, MO, ארה"ב מ סי פפאיה), ficin (F-6008, Sigma מ F. carica), או ברומליין (B-4882, סיגמא מגזע אננס), שפעילותו הפרוטאוליטית נקבעה כמתואר להלן, נוספו, ודיאטות אלה התאימו לשימוש במבחני הביו. העלים המטופלים או הדיאטות המלאכותיות ניתנו לזחלי המדרגה הראשונה או השנייה של ארי סילקמות, מ brassicae, ו ס 'ליטורהומסת הזחלים ותמותה נצפו יומיים ו -4 ימים לאחר תחילת הניסויים. העלים הוחלפו בטריים כל יומיים.

מבחני פרוטאז

שני גרם של עלי פפאיה מטופלים או שאינם מטופלים הומוגניזציה ב -30 מ"ל של מאגר נתרן פוספט (50 מ ', pH 7.0) מקורר עם קרח. ההומוגנטים עברו צנטריפוגה פעמיים (3000 ז למשך 10 דקות, ו -10,000 ז למשך 10 דקות ב -4 מעלות צלזיוס) והתקורות על נאספו. מאתיים מיקרוליטר של מאגר נתרן פוספט (50 מ"מ, pH 7.0) המכילים תגובת שיקוע או אנזימים, התערבבו עם 1 מ"ל של פתרון תגובה המכיל 50 מ"מ נתרן פוספט (pH 7.0), 5 מ"מ ציסטאין, 1 מ"מ EDTA ו -1% קזאין כ- מצע. תגובות בוצעו בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות, ולאחר מכן נוספו 1 מ"ל של 20% טריכלורואצטט להפסקת התגובות. לאחר צנטריפוגה (10 000 ז, 10 דקות), תגובת שיקוע נאספו, ולאחר מכן הספיגות ב -280 ננומטר (א280, נתיב אור באורך 1 ס"מ) נותחו. יחידה אחת הוגדרה כפעילות האנזים שגרמה לעלייה של 0.001 ב א280 לדקה בתנאי התגובה המתוארים לעיל.


שאלות אחרות

כמה פפאין יש במנת פפאיה?

הפפאין נמצא בפפאיה אך לא בכמויות הנחשבות כתרפויטיות. הפפאין המצוי בתוספים מתקבל מהלטקס הדביק של פרי הפפאיה. לטקס, מעצם הגדרתו, הוא תחליב חלבי שמוציא מצמחים מסוימים וקרש כאשר הוא נחשף לאוויר.

לאחר האיסוף, לטקס הפפאיה מיובש ומטהר. לאחר מכן הוא עובר תהליך שבו הלטקס נוזל ואנזים הפפאין מופק בצורה מגובשת. לאחר האבקה, הפפאין משולב בתוספי מזון ותכשירים מקומיים.


דִיוּן

במחקר הנוכחי ערכנו שני מחקרי יעילות מבוקרים אקראיים על מנת להעריך את היעילות של מחסני פפאיה מול ניסויים T. suis זיהומים בחזירים, והדגמנו בבירור כי יישום בודד של מחלות על המינונים הגבוהים יותר המשמשים לטיפול יעיל בהרבה מהנוזל הסינתטי הנפוץ ביותר. לכן, מחקר זה מאשר כי למחלות הפפאיה יש תכונות אנתלמיניות שהן יעילות ביותר נגד טריצ'ורי זיהומים. כאן מינון פומי יחיד של 450 מיקרומול של CPs פפאיה הפחית את הפרשת הביציות ואת עומס התולעים ביותר מ-97%, ללא קשר לרמת עוצמת הזיהום. תוצאות יעילות אלה עדיפות לא רק על תוצאות היעילות של מנה חד פעמית של 400 מ"ג ALB במחקר הנוכחי, אלא גם על רוב תוצאות היעילות ERR שדווחו באוכלוסיות אנושיות ל- ALB ו- MEB, או ניתנות במינון אוראלי יחיד על יום אחד (1×1 ALB: 64.5% 1×1 MEB: 62.7%, Levecke וחב', נתונים שלא פורסמו), או אפילו במספר מנות על פני ימים רצופים (2×1 ALB: 73.5%, 2×1 MEB: 87.1 %[35], 3×1 ALB: 94.0%, 3×1 MEB: 97.3%[36], מנה פומית כפולה ביום אחד (1×2 ALB: 94.8%, 1×2 MEB: 90.3%[37] טיפול יחיד מסוג CP היה גם יעיל בהרבה בהסרה T. suis מכל אחת מהתרכובות האחרות שנבדקו בשנים האחרונות (1 × levamisol: 0%[38], 1 × ivermectin: 86.8%[38], 1 × tribendimidine: 31.1%[11], 1 × nitazoxanide: 13.4%[12] ) ושילובי תרופות (1 × 1 ALB+MEB: 96.1%2 × 1 ALB+MEB: 97.3%[37], 1 × 1 ALB+ivermectin: 91.1%[38] ו- 97.5%[39] ALB+diethylcarbamazine: 79.4 %[39] 2 × 1 ALB+ניטאזוקסניד: 54.9%[35] 1 × 1 MEB+לבמיסול: 85.0%[40] 1 × 1 MEB+איברמקטין: 96.7%[38] פיראנטל-אוקסנטל: 86.9%[41].

למרות תוצאות מבטיחות אלה, ישנם כמה היבטים שעדיין יש להתייחס אליהם לפני שניתן יהיה לראות את הפפאיה CP כתרופה חלופית מקובלת אנתלמינטית לתוכניות מד"א בשליטה על STH. אלה כוללים ניסוח, מינון ובטיחות. נכון לעכשיו, מינון של 450 מיקרומול פפאיה CPs מייצג מסה של

45 גרם, וזה מהווה מכשול חשוב בטיפול בחולים אנושיים ובעלי חיים כאחד אך במיוחד באוכלוסיית ילדים בשל כמות החומרים. עם זאת, בהתחשב בכך שה-CPs ששימשו בעבודה הנוכחית היו כלולים בתמיסה (בניגוד לעבודות קודמות שבהן נעשה שימוש לטקס דמוי ג'ל, Stepek et al.[21], ריכוז נוסף אפשרי, ומגוון של כלי רכב שונים /מטריצות ניתנות לניצול ליצירת מערכת ניסוח ומשלוח בנפח קטן יותר המקובל יותר על לידה דרך הפה.

ניסוי המינון -תגובה הצביע על כך שניתן להוריד את המינון בחצי (225 מיקרול), מבלי לאבד יותר מיעילותו (

80%). למרות שהפחתה זו במינון תהיה גם חצי מהמסה של CP, היא עדיין נשארת משמעותית (

22 גרם) ומבחינת משקל וכמות גדולה יותר מאשר טיפולים אלטרנטיביים, אם כי פחות יעילים.

'פפאין' מצא יישומים שונים בחיי היומיום של אנשים ובתעשיית המזון, ולכן הוא זמין באופן נרחב למטרות אלה, עם פחות רגולציה מאשר תרופות קונבנציונליות. עם זאת, כמויות הפפאין המשמשות את הצרכן למשימות אלו הן בבירור נמוכות בהרבה מהמינון המינימלי שהראה יעילות אנטלמינטית נגד טריכוריאזיס בניסויים שלנו (115 מיקרומול או

11 גרם). כמה תופעות לוואי של מחלות פפאיה דווחו בעבר בבעלי חיים ובני אדם אך אלה נדירות יחסית. בניסויי הכבשים שדווחו על ידי Buttle et al.[27], נצפו שלפוחיות מסוימות דרך הפה, אך זה לא היה רציני במינונים בהם השתמשו[27]. רגורגיטציה של CP והשאיפה שלאחר מכן מהווים איום רציני יותר, אך שוב כאשר ניתנו לבעלי חיים על ידי צוות מיומן היטב משלוח פומי לעכברים לא הביא לאובדן. ניסוחים חדשים המבוססים על סירופים סביר להניח שגם יבטלו זאת כבעיה בטיפול באנשים. CPs הם חלבונים וקיים גם סיכון של התפתחות אלרגיה ליישום התכוף שלהם. עם זאת, יש להדגיש כאן כי תופעות הלוואי רק הוערכו בצורה גרועה עד היום וכי זהו היבט אחד של השימוש ב-CPs של פפאיה, אשר יצטרך להיחקר בצורה יסודית יותר לפני שניתן יהיה לשווק אותם כתכשירי אנטי.

היעילות הלקויה של ALB נגד T. suis (ERR: 59.0-64.4 WRR: 23.2-39.0) לא היה לגמרי בלתי צפוי, שכן תוצאות ERR דומות לאלה שדווחו במטא-אנליזה שנערכו לאחרונה, כולל חמישה ניסויים בהערכת היעילות של מינון חד פעמי של 400 מ"ג ALB לילדי בית ספר קמרון. , אתיופיה, טנזניה וויאטנם (ERR: 64.5% [95% CI: 44.4 84.7] Levecke וחב', נתונים שלא פורסמו). למרות שהתוצאות שלנו מאשרות את התועלת של חזירים כמודל להערכת יעילות התרופה נגד טריכוריאזיס, ציפינו להבדל בולט יותר ביעילות בין שתי רמות עוצמת ההדבקה. ה- ERR ל- ALB נגד טריכוריאזיס בחמשת הניסויים שהוזכרו עם ילדי בית הספר נע בין 29.3% ל- FEC ממוצע בתחילת 1193 EPG, לבין 92.4% עבור FEC ממוצע בתחילת 420 EPG. במחקר הנוכחי, ALB סיפקה תוצאות ERR דומות מול זיהומים נמוכים (FEC ממוצע = 492 EPG, ERR = 64.4%) וזיהומים בעוצמה כבדה (FEC ממוצע = 9267 EPG, ERR = 59.0%). רק ל- WRR היה הבדל בולט ביעילות (נמוך: 23.2% לעומת כבד: 39.0%).

לבסוף, התוצאות שלנו מצביעות על כך שהפרשת הביציות גדלה כפונקציה של עומס התולעים, מה שמרמז על כך ש-FEC הם פרוקסי תקף של עומס התולעים עבור טריכוריאזיס בחזירים.


פעילות אנזים [править | править код]

אם יש לנצל את הפפאין באופן מסחרי לשוק יצוא או לשימוש בתעשיית המזון המקומית, חשוב להיות מסוגל לקבוע את פעילות האנזים. השיטה ידועה כ-assaying. הבדיקה יכולה להתבצע על ידי למשל משרד התקנים הלאומיים.

הפפאין משמש להידרוליזה (או פירוק) של חלבונים. לכן מבחנים למדידת פעילות הפפאין מבוססים על מדידת תוצר של הידרוליזה. ישנן שתי שיטות assay עיקריות. הראשון מסתמך על יכולתו של הפפאין לקריש חלב. זוהי שיטה בעלות נמוכה אך דורשת זמן רב. כמו כן היעדר שיטה סטנדרטית לאיתור נקודת הקרישה והוריאציות באבקת החלב המשמשת עלולות להציג טעויות.

בשיטה זו מוסיפים כמות ידועה של דגימת פפאין (הנעשית על ידי המסת משקל ידוע של פפאין בנפח ידוע של תמיסה של חומצה אצטית) לכמות קבועה של חלב (הנעשית על ידי המסת משקל ידוע של אבקת חלב בכמות ידועה נפח מים) שחומם ל-30°C באמבט מים.

התוכן מעורבב היטב ולאחר מכן נצפה עד להתגלות הסימנים הראשונים של קרישה (היווצרות גושים). הזמן שנדרש להגיע לשלב זה, מרגע הוספת הפפאין לחלב, נרשם. לאחר מכן חוזרים על הניסוי באמצעות כמויות שונות של פתרונות פפאין. הכמויות השונות של דגימת הפפאין המשמשות אמורות לתת טווח של זמני קרישה בין 60 ל 300 שניות לתוצאות מיטביות. לאחר מכן מחושבים את הפעילות של דגימת הפפאין על ידי שרטוט גרף, מציאת הזמן שלוקח לקריש חלב בריכוז אינסופי של פפאין ולאחר מכן שימוש בערך זה בנוסחה לחישוב הפעילות.


כדי להציג מדד של סטנדרטיזציה ניתן לתקן את כמות החלב בריכוז ידוע מסוים. זה נעשה על ידי תגובה של ריכוז ידוע של פפאין ברמה גבוהה עם החלב. לאחר מכן ניתן להתאים את ריכוז תמיסת אבקת החלב לקבלת זמן הקרישה הרצוי בתנאי תגובה קבועים. לאחר מכן ניתן לחשב את ה'פעילות של פפאין טהור' בכמות ידועה זו של חלב. בדיקת הפפאין לדוגמא באותם תנאי תגובה ואותה כמות (ידועה) של חלב תיתן לאחר מכן פעילות ביחס לפפאין הטהור.

השיטה השנייה מבוססת על מדע בליעת האור המכונה ספיגה-טיומטריה. זוהי הטכניקה האנליטית למדידת כמות הקרינה (או 'צבע' האור) שנספגת בתמיסה כימית.

זה ידוע, למשל, תמיסה בצבע צהוב תספוג אור כחול. (כחול הוא 'הצבע המשלים' לצהוב). ככל שריכוז הצהוב בתמיסה גדול יותר, כך ספיגת האור הכחול גבוהה יותר. זוהי תגלית שימושית מכיוון שתוצרים מסוימים של תגובות כימיות הם צבעוניים. ככל שהצבע עז יותר כך ריכוז המוצר גדול יותר. לכן על ידי הארת צבע המשלים הרלוונטי דרך נוזל המדגם כמות האור הנספגת יכולה להיות קשורה לריכוז המוצר.

לא כל ה'צבעים '(או קרינת האור) נראים לעין האנושית. הטכניקה המשמשת כאשר 'הצבעים' משתרעים מעבר לספקטרום הנראה ידועה כספקטרופוטומטריה והמכשיר בו נעשה שימוש נקרא ספקטרופוטומטר.

בשיטה השנייה לקביעת הפעילות של דגימת פפאין, כמות ידועה של דגימת פפאין מעורבת בכמות קבועה של קזאין (החלבון המצוי בחלב). מותר לתגובה להמשיך במשך 60 דקות ב 40 מעלות צלזיוס. לאחר זמן זה, התגובה נעצרת על ידי הוספת חומצה חזקה.

תוצר התגובה ידוע בשם טירוזין הידוע כקולט אור אולטרה סגול (בלתי נראה לעין האנושית). התמיסות המכילות את הטירוזין מוכנות לניתוח באמצעות הספקטרופוטומטר. כמות האור האולטרה סגולה הנספגת בתמיסה יכולה להיות קשורה למספר יחידות הטירוזין המיוצרות על ידי דגימת הפפאין. מכאן שככל שמספר זה גדול יותר, כך גדלה הפעילות של דגימת הפפאין.


פפאין

פאפאין הוא אנזים פרוטאוליטי שמקורו בפפאיה המשמש את תכונותיו האנטי דלקתיות.

שם כללי Papain DrugBank מספר גישה DB11193 רקע

פפאין, הידוע גם בשם פפאיה פרוטאז I, הוא אנזים ציסטאין פרוטאז (EC 3.4.22.2) שנמצא במינים של פפאיה, קאריקה פפאיה ו Vasconcellea cundinamarcensis. נמצא שהאנזים ממוקם בעור הפפאיה, והוא נאסף מפפאיות בוסר חתוכות כלטקס גולמי. פפאין משמש בתעשיות מזון, תרופות, טקסטיל וקוסמטיקה. למרות שהוא שימש לטיפול בדלקות וכאבים באמצעות מתן מקומי, הפפאין הראה גם שיש לו תכונות אנתלמינטיות והלבנת שיניים. האתר הפעיל שלו קיים במוצרי תערובת ללא מרשם, המורכב מאנזימי עיכול שונים, ומכיל דיאטה קטליטי שמשחקת תפקיד בשבירת קשרים פפטידים. פפאין משמש גם כמרכיב בתכשירי פירוק אנזימטיים שונים.


צפו בסרטון: מאיה פפאיה DVD 1 (פברואר 2023).